PURIFICAÇÃO DE ADENOVÍRUS 2 POR CROMATOGRAFIA DE TROCA IÔNICA E AFINIDADE – PERSPECTIVAS PARA PRODUÇÃO DE ANTÍGENO PURO COM MAIOR EFICIÊNCIA
Revista Científica Intelletto
PURIFICAÇÃO DE ADENOVÍRUS 2 POR CROMATOGRAFIA DE TROCA IÔNICA E AFINIDADE – PERSPECTIVAS PARA PRODUÇÃO DE ANTÍGENO PURO COM MAIOR EFICIÊNCIA
Autor Correspondente: Inarei José Paulini | [email protected]
Palavras-chave: adenovírus, hexon, purificação, Cromatografia
Resumos Cadastrados
Resumo Português:
Os adenovírus humanos podem causar infecções gastrointestinais, urogenitais e respiratórias tanto em crianças como adultos. As técnicas diagnósticas utilizadas para detecção de adenovírus ainda necessitam de ajustes para melhor eficiência. Amostras de hexon de adenovírus purificado podem ser direcionados para produção de anticorpos monoclonais. Esse trabalho teve como objetivo a produção e purificação de antígeno de adenovírus. Células em monocamada foram infectadas com adenovírus e após processo de purificação inicial foram submetidas a dois tipos cromatografia. A ultracentrifugação utilizando gradiente de cloreto de césio permitiu eliminar a maior parte de moléculas vindas de células inoculadas. A cromatografia de troca iônica mostrou ter bom desempenho. A cromatografia de afinidade foi satisfatória, mas apresentou pouco rendimento. Os dois processos de cromatografia podem ser utilizados no processo de obtenção de hexon de adenovírus com alto grau de pureza. O processo de cromatografia de troca iônica apresenta melhor eficiência e tem melhor custo benefício.
Resumo Inglês:
Human adenovirus (HAdV) present 67 serotypeswhich are causative agents of infections in the gastrointestinal, uro-genital, and neurological systems, both in children and adults. HAdV are rarely diagnosed due to the lack of sensitive, practical and cost-benefits diagnostic tests. The aim of the present study is to produce HAdV-2 hexon protein which will be applied in diagnostics tests assembly. Monolayers cells was infected adenovirus 2. When the cytopathic effect was evident, the cells were clarified by centrifugation. The supernatants were collected and the precipitated by ultracentrifugation. Viral particles and soluble proteins in the supernatant were purified in cesium chloride gradients . Proteins fraction of the gradient were analyses by eletroforesis and electronic microscopy. This sample was purified by ion exchang and affinity chromatography. The ion exchange chromatography process presents better efficiency and has a better cost benefit.
