UTILIZAÇÃO DA COMPOSIÇÃO TOTAL DE ÁCIDOS GRAXOS NA CARACTERIZAÇÃO DE FUNGOS MICORRÍZICOS DA ORQUÍDEA Epulorhiza spp.

Ano: 2010 | Volume: 1 | Número: 1

Autores: Marlon Corrêa Pereira, Nívea Moreira Vieira, Sabrina Oliveira Feliciano, Fernanda Aparecida Rodrigues Guimarães, Marcos Rogério Tótola, Maria Catarina Megumi kasuya

Palavras-chave: FAME, fungos rizoctonióides, ITS-rDNA.

Resumo Português:

Os fungos rizoctonióides são os principais fungos micorrízicos de orquídeas. A identificação e a
análise de diversidade desses fungos têm sido realizadas pela análise de características
morfológicas e moleculares. Entretanto, a composição de ácidos graxos, que é uma técnica
molecular utilizada no estudo de fungos rizoctonióides fitopatogênicos, não tem sido
empregada em fungos micorrízicos de orquídea. O objetivo deste trabalho foi caracterizar e
agrupar os fungos rizoctonióides micorrízicos de orquídeas com base na composição de ácidos
graxos, bem como comparar esse agrupamento com a análise da seqüência da região ITS do
rDNA. Foram selecionados seis isolados de fungos rizoctonióides. Cinco isolados são micorrízicos
de orquídea: três isolados de Epidendrum secundum, previamente identificados como
Epulorhiza sp., e dois de Epidendrum denticulatum. O sexto é um isolado de fungo
fitopatogênico Ceratorhiza sp. AGC. Os isolados foram crescidos em tubos contendo 1 mL do
meio BD (batata dextrose – Acumedia), a 28 °C. Após 4 dias, o micélio foi congelado e liofilizado.
Os ésteres metílicos de ácidos graxos, extraídos conforme o protocolo do método MIDI
(Microbial Identification System), foram identificados e quantificados em cromatografia gasosa
utilizando o software Sherlock (MIDI Inc., versão 4.5). Para amplificação da região ITS, o DNA
total dos fungos foi extraído e a reação de PCR conduzida utilizando o par de oligonucleotídeos
iniciadores ITS1/ ITS4. Os agrupamentos gerados com base na composição dos ácidos graxos
possibilitaram a distinção entre o isolado Ceratorhiza sp. AGC e os isolados de Epulorhiza spp.,
assim como entre as duas espécies Epulorhiza spp. estudadas. O mesmo foi observado na
análise da seqüência da região ITS dos isolados pelo método Neighbor-Joining e o modelo
Kimura 2-Parameter. A análise da composição de ácidos graxos pela distância de Mahalanobis
distinguiu claramente os isolados de E. denticulatum dos dois isolados de Epulorhiza sp.1
obtidos de E. secundum, sugerindo que a essa distância gera agrupamentos com melhor
resolução. A análise da composição de ácidos graxos é uma ferramenta útil na caracterização,
identificação e análise da diversidade de fungos micorrízicos rizoctonióides.