Some Biochemical Properties of Polyphenoloxidase from Spearmint (Mentha arvensis)

Ano: 2009 | Volume: 52 | Número: 4

Autores: Valdir Augusto Neves, Douglas Gatte Picchi, Maraiza Aparecida da Silva

Palavras-chave: polyphenoloxidase, mentha arvensis, characterization, heat inactivation, inhibitors

Resumo Português:

Polifenoloxidase (PPO, EC 1.14.18.1) extraída de
folhas de Mentha arvensis foi isolada por
precipitação com (NH4)2SO4 e diálise extensiva.
Seu pH e temperatura ótimos variaram com o
substrato. A PPO apresentou atividade com vários
difenóis. Valores de Km foram 0,825; 0,928 e 7,41
mM para ácido caféico, 4-metilcatecol e catecol,
respectivamente. Na inativação térmica, 50% da
enzima foi inativada após 60 e 15 segundos a 70 e
75°C, respectivamente. A medida de atividade
residual mostrou um efeito estabilizante de
sacarose a várias temperaturas e uma energia de
ativação (Ea) para inativação aumentando com a
concentração de sacarose de 0 a 40% (p/p).
Valores de energias de ativação de 78,13; 80,37;
82,79 and 81,00 kJ/Mol foram encontradas para 0,
15, 30 e 40% de sacarose, respectivamente. A PPO
foi inibida pelos ácidos ascórbico, benzóico,
cinamico, ferulico, p-cumárico, protocatéquico,
além de metabisulfito de sódio, resorcinol e
pirogalol. Os valores de Ki mostram que o ácido
ascórbico foi o mais efetivo inibidor. O tipo de
inibição foi determinado para cada inibidor.

Resumo Inglês:

Polyphenoloxidase (PPO; EC 1.14.18.1) extracted from Mentha arvensis leaves was isolated by (NH4)2SO4
precipitation and extensive dialysis. Its optimum pH and temperature varied with the substrate. The PPO showed
activity with various diphenols. Km values were found 0.825, 0.928 and 7.41mM for caffeic acid, 4-methylcatechol
and catechol, respectively. On heat-inactivation, half of the activity was lost after 60 and 15 sec at 70 and 75°C,
respectively. Measuring of residual activity showed a stabilizing effect of sucrose at various temperatures with
activation energy (Ea) for inactivation increasing with sucrose concentration from 0 to 40% (w/w). Ea values of
78.13; 80.37; 82.79 and 81.00 kJ/Mol were found for 0, 15; 30 and 40% sucrose, respectively. PPO was inhibited by
ascorbic, benzoic, cinnamic, ferulic, p-coumaric, protocatechuich acids, sodium metabisulfite, pyrogallol and
resorcinol. The Ki values showed that ascorbic acid was the most effective inhibitor. The type inhibition was
determined for each inhibitor.