Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration from Callus Cultures of Cleome rosea Vahl

Ano: 2010 | Volume: 53 | Número: 3

Autores: Claudia Simões, Norma Albarello, Cátia Henriques Callado, Tatiana Carvalho de Castro, Elisabeth Mansur

Palavras-chave: auxin, embriogenic callus, histology, phytagel, somatic embryos

Resumo Português:

O trabalho descreve um protocolo para a
propagação in vitro de Cleome rosea por
embriogênese somática. Explantes foliares e
caulinares, obtidos de plantas germinadas sob
condições in vivo, foram cultivados em meio de
Murashige and Skoog (MS) suplementado com
ácido 3-indolacético (AIA), ácido naftalenoacético (ANA), ácido 4-amino-3,5,6-tricloropicolínico
(picloram) ou ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-
D). Calos de aspecto nodular foram produzidos a
partir de ambos os tipos de explante na presença
de 4,5 e 9,0 μM de 2,4-D. O desenvolvimento e a
maturação de embriões somáticos foram
alcançados quando calos obtidos de explantes
caulinares foram transferidos para meio de cultura
suplementado com uma concentração de 2,4-D dez
vezes menor do que aquelas utilizadas na indução
do processo de calogênese (0,45 e 0,90 μM). Calos
derivados de explantes foliares não produziram
embriões ao serem submetidos a estes mesmos
tratamentos. Os maiores valores de freqüência de
calos embriogênicos (85%) e número médio de
embriões por calo (13,45±2,8) foram alcançados
durante a primeira subcultura em meio
suplementado com 0,90 μM de 2,4-D. O processo
de conversão dos embriões somáticos em plantas
foi observado após transferência dos embriões
para meio MS sem suplementação hormonal
solidificado com 2 g.L-1 de fitagel. Três meses
após a transferência para condições ex vitro a taxa
de aclimatização alcançada foi de 53% e as plantas
apresentavam um aspecto fenotípico normal.

Resumo Inglês:

This paper describes a protocol for the efficient vegetative propagation of Cleome rosea by somatic embryogenesis.
Leaf and stem explants from nursery-grown seedlings of C. rosea were cultivated on Murashige and Skoog (MS)
medium supplemented with indole-3-acetic acid (IAA), a-naphthaleneacetic acid (NAA), 4-amino-3,5,6-
trichloropicolinic acid (picloram) or 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). Nodular calli were produced from
both explant types in the presence of 4.5 and 9.0 μM 2,4-D. Embryo development and maturation were achieved
when calli from stem explants were transferred to media containing a ten-fold reduction of 2,4-D concentration
initially used (0.45 and 0.90 μM). Leaf-derived calli did not form embryos with the same treatments. The highest
frequency of embryogenic callus formation (85%) and number of embryo per callus (13.45±2.8) were achieved
during the first subculture on medium supplemented with 0.90 μM 2,4-D. Embryo conversion into plantlets was
achieved following transfer to growth regulator-free MS medium solidified with 2 g.L-1 phytagel. An acclimatization
rate of 53% was found three months after transfer to ex vitro conditions and the recovered plants presented a
normal phenotypic aspect.