Production and Characterization of Monoclonal Antibodies Anti Fragment Fc of Bovine IgG

Ano: 2010 | Volume: 53 | Número: 1

Autores: Tânia Regina Penha, Ernesto Renato Krüger, Vanete Thomaz-Soccol, Jorge Victor Bacila Agottani, Flávio Hiroshi Itano, Ludmilla Della Coletta Troiano, Josiane Brodzinski

Palavras-chave: monoclonal antibodies, monoclonal antibodies, bovine immunoglobulin g, fragment fc

Resumo Português:

No Brasil, anticorpos anti-espécie específica
usados em métodos de diagnóstico geralmente são
importados, aumentando o custo das análises.
Visando produzir insumos para métodos
diagnóstico por enzimaimunoensaio, o presente
trabalho teve como objetivo produzir e caracterizar
anticorpos monoclonais anti imunoglobulina G
(IgG) bovina. De sete hibridomas obtidos e que
apresentaram valores relevantes de absorbância em
teste imunoenzimático (ELISA indireta), dois
clones com melhor performance foram
selecionados e designados B4F11 e B3H12. Estes
anticorpos monoclonais foram analisados em
Western Blot para reatividade com fragmentos de
IgG bovina, obtidos por proteólise com papaína e
separados por eletroforese em gel de
poliacrilamida, com presença do agente redutor
beta-mercaptoetanol. A eletroforese mostrou que o
anticorpo B4F11, foi direcionado para um
antígeno conformacional, e que o monoclonal
B3H12 reagiu especificamente com a porção Fc da
IgG bovina (fragmento cristalizável). Este
anticorpo será utilizado no desenvolvimento de
reagentes para imunoensaios de interesse à
pesquisa e diagnósticos.

Resumo Inglês:

The aim of this work was to produce and characterize monoclonal antibodies anti bovine immunoglobulin G (IgG).
Out of seven hybridomas, two were chosen based on the ELISA’S absorbance values and were labeled B4F11 and
B3H12. These monoclonals were analyzed through Western Blot for IgG fragments obtained by proteolysis with
papain, separated by electrophoresis in polyacrylamide gel electrophoresis with β-mercaptoetanol as reducing
agent. This revealed that, possibly, the B4F11 was directed to a conformational antigen, and that B3H12 reacted in
a specific fashion with Fc (Bovine IgG crystallizable fragment). This antibody could be used in the development of
reagents to immunoassays relevant for research and diagnosis.