New Method for Early Detection of two Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Groups of Staphylococcus aureus Causing Bovine Mastitis Infection in Paraná State, Brazil
Brazilian Archives Of Biology And Technology
New Method for Early Detection of two Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Groups of Staphylococcus aureus Causing Bovine Mastitis Infection in Paraná State, Brazil
Autor Correspondente: Dicezar Gonçalves | [email protected]
Palavras-chave: staphylococcus aureus, molecular markers, subclinical mastitis, clinical mastitis, mastitis detection
Resumos Cadastrados
Resumo Português:
Esta pesquisa objetivou o desenvolvimento de
técnica rápida e eficiente para diagnosticar
precocemente diferentes linhagens de S. aureus
causadoras de mastite bovina. Como resultados da
metodologia empregada, foram isoladas duas
linhagens destas bactérias que causam diferentes
tipos de mastite bovina. Os fragmentos de DNA
genômico caracterizando ambas as linhagens, por
meio de RAPD foram inseridos em vetor
plasmidial pGEM e clonados por meio de clones
T10 F1 de Escherichia coli. As seqüências obtidas
permitiram desenhar iniciadores especÃficos para o
reconhecimento de ambas as linhagens, os quais
foram testados com amostras de S. aureus e com
outras linhagens próximas. O diagnóstico por
meios moleculares, pode ser realizado diretamente
de amostras coletadas de rebanhos leiteiros assim
como dos equipamentos de ordenha. A
significância deste estudo consiste em um rápido e
acurado método para localizar animais infectados,
representando importante ferramenta no manejo do
rebanho, na redução de custos com tratamentos e,
rápida recuperação de rebanhos infectados.
Resumo Inglês:
The aim of this work was to develop a fast and accurate molecular approach to allow early detection of two RAPD
groups of S. aureus causing bovine mastitis. Seventy five S. aureus isolates from infected animals were characterized
by RAPD. Genomic fragments isolated from the unique bands present in either group were cloned and sequenced.
Based on the DNA sequences, specific primers were designed to allow for the simultaneous detection of either group
by multiplex PCR of S. aureus DNA isolated from clinical and subclinical bovine mastitis. Results showed that these
proposed primers set could be used to detect various clinical and subclinical S. aureus isolates as well as the
detection of the microorganism in bulk milk. Their use as a specific method for effective and early diagnostic tool
for S. aureus infection in dairy herds is suggested.
