Molecular Weight Estimation of Esterase Isoenzymes in Closely Related Drosophila Species (Diptera: Drosophilidae) in Non-Denaturing Polyacrylamide Gel Electrophoresis

Ano: 2009 | Volume: 52 | Número: 5

Autores: Rogério Pincela Mateus, Hamilton Cabral, Gustavo Orlando Bonilla-Rodriguez, Carlos Roberto Ceron

Palavras-chave: esterases, isoenzymes, molecular weight determination, drosophila mojavensis, drosophila arizonae, page

Resumo Português:

Neste trabalho, um método que permite a
estimativa do peso molecular de duas esterases
conhecidas e intimamente relacionadas,
encontradas em Drosophila mojavensis e sua
espécie aparentada D. arizonae, é descrito. Este
método é realizado utilizando a técnica de
eletroforese em diferentes concentrações de gel e
aplicando os princípios de Fergunson. As enzimas,
denominadas EST-4 e EST-5, apresentaram pesos
moleculares entre 81 e 91 kDa. Apesar de seus
padrões diferenciados de expressão durante o ciclo
de vida do inseto, elas demonstraram propriedades
de enzimas codificadas por genes estruturais
distintos, corroborando a hipótese de um evento de
duplicação gênica recente que gerou ambas em D.
mojavensis e D. arizonae, bem como em outras
espécies do grupo repleta. O método proposto é
simples e adequado para ser utilizado em
estimativas preliminares de determinação de pesos
moleculares de outras enzimas sem haver a
necessidade de um procedimento prévio de
purificação.

Resumo Inglês:

A method that allows the measure of molecular weight of two well-known and closely related esterases from
Drosophila mojavensis and its sibling species, D. arizonae, is here described, using native polyacrylamide gel
electrophoresis at several concentrations, applying Fergunson´s principles. These enzymes, namely EST-4 and EST-
5, presented molecular weight values between 81 and 91 kDa. In spite of their distinct expression pattern through
the insect’s life cycle, they showed properties of isoenzymes codified by distinct structural genes, supporting the
hypothesis of a rather recent gene duplication event that generated both in D. mojavensis and D. arizonae, as well
as in other species of repleta group. The method is simple and adequate to be applied to preliminary molecular
weight determination of other enzymes without any previous purification procedure.