FRACIONAMENTO E AVALIAÇÃO DOS EFEITOS SOBRE A COAGULAÇÃO SANGUÍNEA DE FUCANAS SULFATADAS DE UM HIDROLISADO ENZIMÁTICO OBTIDO DA FEOFÍCEA Spatoglossum schroederi (MERTENS) KÜTZING

Ano: 2010 | Volume: 5 | Número: 2

Autores: José Ariévilo Gurgel RODRIGUES, Norma Maria Barros BENEVIDES

Palavras-chave: feofícea, polissacarídeos sulfatados, digestão proteolítica, teste do ttpa

Resumo Português:

Fucanas sulfatadas (FS) são polímeros aniônicos complexos e heterogêneos encontrados em
grandes quantidades nas algas marinhas pardas. A obtenção desses compostos é influenciada
pela utilização de diferentes protocolos de extração. Desta forma, neste trabalho objetivou-se
fracionar e avaliar possíveis efeitos de FS obtidas do hidrolisado enzimático da alga parda
Spatoglossum schroederi na coagulação sanguínea. As FS foram extraídas com papaína bruta
em tampão acetato de sódio 0,1 M (pH 5,0) contendo cisteína 5 mM e EDTA 5 mM, seguida
por cromatografia de troca iônica (DEAE-celulose) utilizando um gradiente de NaCl, sendo as
frações de FS monitoradas por metacromasia e açúcares totais (AT). Uma fração rica em FS foi
avaliada quanto à presença de ácido urônico (AU) e analisada por eletroforese em gel de
agarose a 0,5%. O teste do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) foi utilizado para
avaliar possíveis efeitos das FS sobre a coagulação sanguínea, usando plasma humano normal.
O rendimento de FS foi 22,98% e o perfil cromatográfico indicou a separação de duas
diferentes frações de FS (F I e F II), eluídas nas concentrações 0,50 e 0,70 M de NaCl,
respectivamente, com elevado teor de AT. Em F I também foi detectada AU e a eletroforese
revelou a ocorrência de duas FS, com densidades de cargas diferentes entre elas. Os resultados
foram divergentes quando comparados a outros estudos já realizados com a espécie. S.
shroederi apresentou FS que não alteraram o TTPA normal. Portanto, a pesquisa demonstrou a
detecção de duas FS destituídas de atividade anticoagulante in vitro.

Resumo Inglês:

Sulfated fucans (SF) are complex and heterogeneous anionic polymers found in high
concentrations in brown seaweeds. However, the use of different protocols can influence the
obtaining of these compounds. The aim of this study was to fractionation and evaluate possible
effects of SP obtained from the enzymatic hydrolysate from the brown alga Spatoglossum
shroederi on blood coagulation. SF were extracted with crude papain in 0.1 M sodium acetate
buffer (pH 5.0) containing 5 mM cysteine and 5 mM EDTA, followed by ion-exchange
chromatography (DEAE-cellulose) using a NaCl gradient, being the SF fractions monitored by
metachromasia and total sugars (TS). A rich fraction of SF was measured uronic acid (UA),
and then submitted to 0.5% agarose gel electrophoresis. The activated partial thromboplastin
time (APTT) test was used to evaluate a possible effect of SF on blood coagulation, using
normal human plasma. The yield of SF was 22.90%, and the chromatographic profile indicated
the separation into two different fractions of SF (F I and F II) eluted in concentrations of 0.50
and 0.75 of NaCl, respectively, with high level of TA. UA was also detected in F I, and two SF
differing in their charge density were revealed by electrophoresis. The results were considered
different when compared to other studies already reported to the species. SP from S. schroederi
had no influence on normal APTT. Therefore, this study showed the presence of two SF devoid
of in vitro anticoagulant activity.