Objetivou-se, com este trabalho, estudar a
embriogênese somática indireta em Coffea arabica L.
cv. Obatã, incluindo as etapas de indução de calos, diferenciação,
regeneração e formação de embriões. Segmentos
foliares retirados de plantas em condições de
campo foram desinfestados com álcool 70% por 1 e hipoclorito
de sódio 1% durante 15 e inoculados em
meio IC (indução de calos) suplementado de 2,4-D (0,
1, 2 e 4 mg.L-1) e Cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L-1). Posteriormente,
os calos foram transferidos para o meio DC
(diferenciação de calos), adicionado de diferentes concentrações
de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L-1) e BAP (0, 2, 4 e
8 mg.L-1); em seguida, durante a etapa de regeneração,
os calos embriogênicos friáveis foram inoculados em
meio R suplementado de BAP (0, 2, 4 e 6 mg.L-1) e
sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g.L-1). Os meios de cultura
utilizados tiveram pH ajustado para 5,6 1 antes de serem
autoclavados. Os experimentos foram mantidos em
sala de crescimento a 26 10C. Durante as etapas de indução
e diferenciação de calos, os experimentos ficaram
em condições de obscuridade, e na etapa de regeneração,
os experimentos foram mantidos sob fotoperÃodo
de 16 horas e intensidade luminosa de 35 mol.m-2.s-1. Concluiu-
se que a combinação entre 4 mg.L-1 de 2,4-D e 2
mg.L-1 de cinetina favoreceu a indução de calos primários
mistos. Maior freqüência de calos embriogênicos
friáveis ocorreu na presença de BAP (8 mg.L-1), associado
ou não ao 2,4-D, e maior número de embriões por
explante foram obtidos quando utilizou-se sacarose (30
g.L-1) e BAP (3 mg.L-1).
It was aimed with this work to study the
indirect somatic embryogenesis in Coffea arabica L. cv.
'Obatã', including the steps of induction, differentiation
and regeneration of plants. Leaf segments withdrawn
from plants under field conditions were disinfected with
70% alcohol for 1 , 1% sodium hypochlorite for 15 and
inoculated in 'CI' medium (callus induction)
supplemented with 2,4 D (0, 1, 2 and 4 mg.L-1) and
kinetin (0, 2, 4 and 8 mg.L-1). Later, the callus were
transferred to the 'CD' medium (callus differentiation) to
which was added 2,4-D (0, 1, 2 and 4 mg.L-1) and BAP
(0, 2, 4 and 8 mg.L-1). During the regeneration step,
friable embryogenic callus were inoculated in 'R'
medium supplemented with BAP (0, 2, 4 and 6 mg.L-1)
and sucrose (0, 15, 30, 45 and 60 g.L-1). The culture
media utilized had their pH adjusted to 5.6 ± 1 before
being autoclaved. The experiments were kept in growth
room at 26 ± 1oC. Over the steps of callus induction and differentiation, the experiments were
carried out in dark conditions and at the regeneration step
the experiments were carried out under 16-hour
photoperiod and light intensity of 35 mol.m-2.s-1. It was
observed that the combination of 2,4-D and kinetin favors
the induction of primary callus. High frequency of friable
embryogenic callus was observed with BAP (8 mg.L-1),
combined or not with 2,4-D, and greater number of
embryos per explant, when sucrose (30g.L-1) and BAP (3
mg.L-1) was utilized.
