Cytochrome P450 Detection in Liver of the Catfish Ancistrus multispinis (Osteichthyes, Loricariidae)

Ano: 2010 | Volume: 53 | Número: 2

Autores: Claudio Klemz, Ligia Maria Salvo, Jayme da Cunha Bastos Neto, Afonso Celso Dias Bainy, Helena Cristina da Silva de Assis

Palavras-chave: cytochrome p450, fish, ancistrus multispinis, biomarker

Resumo Português:

Respostas biológicas sensíveis aos contaminantes
ambientais são úteis para prever efeitos
prejudiciais devido a exposições crônicas.
Padronização de protocolos para quantificar
parâmetros bioquímicos em diferentes espécies de
peixes é necessária para validar o uso como
biomarcador. Estudos comparativos de diferentes
espécies de peixe e sua interpretação são um
avanço para a validação do uso de biomarcadores
gerais, representativos do impacto ambiental.
Neste estudo o protocolo para a análise do
citocromo P450 (CYP) do peixe nativo brasileiro
Ancistrus multispinis foi estabelecido. Cyp é um
biomarcador de exposição principalmente de
hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HAP),
bifenilas policloradas (PCB) e dioxinas. A
contaminação do microssomo pela hemoglobina
durante as análises do CYP no fígado foi
detectada, levando a uma interpretação errônea dos
resultados. O método espectrofotométrico para
análise do CYP foi adaptado para diminuir a
interferência da hemoglobina. Além disso, o
método de western blotting para análise de
CYP1A foi testado com sucesso para essa espécie
de peixe.

Resumo Inglês:

Sensitive biological responses to environmental contaminants are useful as early warning signals to predict the
damages by long-term exposure. Protocols standardization to quantify biochemical parameters in different fish
species is required to validate its use as biomarkers. Comparative studies from different fish species and its
interpretation are a challenge for the validation of its use as general biomarkers, representative of environmental
impact. In this study, the protocol for liver cytochrome P450 (CYP) analysis from the native Brazilian fish Ancistrus
multispinis was established. The microsome contamination by hemoglobin during the analysis of CYP in liver was
detected, leading to misinterpretation of the results. The spectrophotometric method for CYP analysis was adapted
in order to diminish the hemoglobin interference. Additionally, the western blotting method for CYP1A analysis was
tested with success for this fish species.