Cryopreservation of dog spermatozoa: effect of bovine serum albumin on acrosomal integrity and pregnancy rates after artificial insemination

Ano: 2007 | Volume: 12 | Número: 2

Autores: SANTOS IW, BINSFELD LC, WEISS RR, KOZICKI LE, ROCHADELLI R, RESENDE MV, HOSSEPIAN DE LIMA VFM

Palavras-chave: bitch, oestrus, extenders, sêmen

Resumo Português:

Objetivo do presente trabalho foi comparar
a performance de sêmen de cachorro in vitro
e in vivo com soro de albumina bovina – tris (TB) e
diluente de gema de ovo com Tris (TR). Para isso,
foram usados vinte cães como doadores. O sêmen
dos cães foi colhido via massagem peniana. Semanalmente
a fração rica espermática foi colhida até
quarenta ejaculados. Após o exame macroscópico
e microscópico, as amostras foram diluídas em
partes iguais de cada ejaculado com (TB e TE), pelo
método one-step a 32º C. O sêmen foi embalado
em palhetas francesas de 0,5 mL, as quais apresentaram
características normais antes e após o
congelamento. Foi avaliado a integridade cromossômica
pelo método de coloração azul tripan giemsa,
observando-se espermatozóides vivos intactos (LI),
vivos com reação (LR), mortos intactos (DI), mortos
com reação (DR). Os espermatozóides foram identificados
pelo tempo de descongelamento e após
4 horas de incubação a 39ºC, o (TE) foi significativamente
superior ao TB (P < 0,01) nas variáveis
LI e LR. O TB foi significativamente superior ao TE
(P < 0,01) na variável DR. Cadelas no estro natural
foram submetidas à inseminação artificial, vinte
delas recebendo sêmen com TE e vinte recebendo
sêmen com TB mediante o uso de uma pipeta de
Osiris ( IMV, L‘Aigle, France). Os resultados indicaram
que o grupo TE foi significativamente melhor
que TB (P < 0,01) em relação à taxa de prenhez
e ao número de filhotes. Concluiu-se neste estudo
que o grupo TE foi melhor que TB, porque isto induziu
a uma reação acrossômica mais precoce no
sêmen canino.

Resumo Inglês:

The objective of the present study was
to compare the in vitro and in vivo profile of frozen
dog semen with Tris-bovine serum albumin (TB)
and Tris-egg yolk (TE) extenders. Twenty dogs
were used as donors. Each dog was stimulated by
penile massage and only the sperm-rich fraction
was collected weekly until 40 ejaculates were obtained.
After macroscopic and microscopic analysis,
equal parts of each ejaculate were diluted with TB
and TE by the one-step method at 37 ºC. The semen
was added to 0.5-mL French straws which presented
normal characteristics before freezing and
after thawing. Acrosomal integrity was evaluated by
double Trypan blue-Giemsa staining, in which alive
intact (LI), alive reacted (LR), dead intact (DI) and
dead reacted (DR) spermatozoa, were identified
by the time of thawing and up to 4 h of incubation
at 39 °C, the TE being significantly superior to TB
(P<0,01) in the LI and LR variables. The TB being
significantly superior to TE (P<0,01) in the DR variable.
Female dogs in natural heat were submitted to
artificial insemination, 20 receiving TE-semen and
20 receiving TB-semen with the Osiris probe (IMV,
L’Aigle, France) and the numbers indicate that TE
was significantly better than TB (P<0,01) to pregnancy
rate and number of puppies/delivery. We
concluded from this study, that TE was better than
TB, because this, induced an early acrossome reaction
in dog’s sperm.